552351 Wahlfachprogramm Histologie: Spez. Präp.-methoden in d. Ultrastrukturforschung
Sommersemester 2007 | Stand: 28.11.2006 | LV auf Merkliste setzen552351
Wahlfachprogramm Histologie: Spez. Präp.-methoden in d. Ultrastrukturforschung
VU 2
Block
semestral
Deutsch
Das Potential der vielfältigen elektronen-mikroskopischen (EM) Untersuchungsansätze für die biomedizinische Grundlagenforschung (Zell-/Molekularbiologie) wie für die klinisch angewandte Forschung wird im Detail dargelegt.
Theoretische Grundlagen und ausgewählte Laborprotokolle zu:
1) Präparation von Proben aller Art (Zellen, Zell-/Gewebskulturen, Biopsien, Hefe, Mikroorganismen, Pilze/Pflanzen) für TEM & SEM:
(i) Standardprotokolle (chemische Fixierung, Kunstharzeinbettung & Mikrotomie, Negativkontrastierung, Kritisch-Punkt-Trocknung, Probenbeschichtung)
(ii) moderne Tieftemperaturmethoden (Gefrierfixierung, Gefriersubstitution, Gefrierbruch-Replica-Technik, Kryo-TEM/-SEM)
2) Immuno-Elektronen-Mikroskopie (Probenpräparation, Antikörpermarkierung (i) permeabilisierter Zellen/Gewebsschnitte=pre-embedding labeling; (ii) intakter Kunstharz- oder ultradünner Gefrierschnitte=postembedding labeling oder „Tokuyasu“-labeling).
3) Korrelative „live-cell“-LM- und EM
4) 3D-Rekonstruktion mittels (i) Schnittserien, (ii) Elektronen-Tomographie
5) Präparationsartefakte und deren Minimierung
6) Sicherheit im (histologischen und) EM-Labor
VO & Demonstrationen (bzw. -in Abhängigkeit von der Teilnehmerzahl- auch praktische Übungen), Fallbeispiele.
Teilnahmebestätigung ohne Prüfung;
mündliche Prüfung, nur falls Zeugnis mit Note erwünscht (z.B. für Stipendien)
Grundlegendes: Griffiths G et al (2001) Cell. Microbiol 3:659-668 (http://www.blackwell-synergy.com/links/doi/10.1046/j.1462-5822.2001.00142.x/full/)
etwas spezieller: McIntosh JR (2001) J Cell Biol 153:F25-32 (http://www.jcb.org/cgi/reprint/153/6/F25.pdf), Hess MW et al (2000) J Struct Biol 130: 63-72 (http://www.idealibrary.com/links/citation/1047-8477/130/63), Hess MW (2003) J Microsc 212:44-52 (http://www.blackwell-synergy.com/links/doi/10.1046/j.1365-2818.2003.01237.x/full/)
Vorbesprechung: 06.03.2006, 12:00h, GLEICHZEITIG bzw. in VERBINDUNG mit der Vorbesprechung zu LV "552.143 von K. Pfaller, EM& REM-Demonstrationen", Ort: Kurssaal der Div. Histologie, 2. Stock des Dept. f. Anatomie, Histologie, Embryologie Müllerstrasse 59
Beginn: 1. VO 17.01.06, 09:00 Histo-HS
Beginn: 1. VO 17.01.06, 09:00 Histo-HS
Institut für Anatomie, Histologie und Embryologie, Inst. f. Anatomie und Histologie